Determinación de la actividad de la papaína

Este método sólo funciona con papaína. 1. Solución de sustrato: Pese con precisión 1,42 g de clorhidrato de éster etílico de N-benzoil-L-arginina, agregue 10 mmol/L de LED TA, 50 mol/L de solución de cisteína, agregue la cantidad adecuada de agua, ajuste el pH a 6,2 con 0,1 mol/L de solución de hidróxido de sodio y finalmente ajustar al volumen.

2. Solución enzimática a analizar: diluir la muestra con agua hasta una concentración adecuada, ajustar a pH 6,2, colocar un vaso de precipitados de 25 ml en un valorador de pH automático a una temperatura constante de 25 °C y agregar. 3,75 ml de solución de sustrato, 2,50 ml de solución de cloruro de sodio de 3 mol/L y 1,25 ml de agua destilada, inmediatamente después de mezclar, use 0,1 mol/L de hidróxido de sodio para valorar continuamente a pH 6,2 con agitación electromagnética y registrar el consumo de 0 por minuto. Realice también la corrección en blanco. Calcular la actividad p (unidad/mg) de la papaína según la siguiente fórmula:

p = CδV 1000/W

Donde: c: concentración de solución de hidróxido de sodio, mol/l δ v: El volumen de solución de hidróxido de sodio consumido por minuto menos el valor en blanco w: La masa de papaína en la solución de reacción, mg;