Conozca los métodos de funcionamiento detallados de la estación de trabajo de cromatografía líquida Agilent 1260.
1. Encienda la computadora;
2. Encienda cada módulo de cromatografía líquida.
3. "LC1260 (en línea)" en el escritorio "Ingrese a la interfaz en línea;
2. Escape:
1. Afloje manualmente la válvula de descarga de la bomba (gírela en sentido antihorario aproximadamente 1 vuelta) .
2. Haga clic con el botón derecho en el área del icono "Bomba", seleccione la opción "Método", ingrese a la interfaz de edición de la bomba, establezca el caudal en 5 ml/min y haga clic en "Aceptar". >
3. Haga clic con el botón derecho en el área del icono "Bomba", haga clic en la opción "Control", seleccione "Activado" y haga clic en "Aceptar", el sistema comenzará a lavarse hasta.
Hasta que no haya burbujas de aire en la tubería (desde la botella de solvente hasta la entrada de la bomba) (generalmente 5 minutos), cambie de canal y continúe lavando hasta que se utilicen todos los canales.
Hasta que no haya burbujas.
4. Haga clic con el botón derecho en el icono "Bomba", haga clic en la opción "Método", establezca el caudal en 0 ml/min y apriete manualmente. la válvula de lavado;
5. Haga clic con el botón derecho en el icono "Bomba", haga clic en la opción "Método", seleccione la fase móvil adecuada según los requisitos del método y establezca el caudal en 1,0 ml/min. ; (no necesariamente 1);
6. De manera similar, haga clic derecho en los íconos "Column Comp" y "DAD", haga clic en la opción "Método" y luego presione;
7. Configure la temperatura y la longitud de onda de acuerdo con los requisitos del método, haga clic en la opción "Control" y "Encendido" enciende el horno de columna y el detector;
Editar método:
1. Haga clic en "Método" - "Editar método completo" para comenzar a editar el método completo;
2. Seleccione tres elementos excepto "Análisis de datos" para ingresar a la siguiente pestaña, seleccione "Als" y haga clic en "Aceptar". " para ingresar a la siguiente opción;
3. Seleccione la opción "Información del método" del menú "Método", agregue información del método (como:
¡Esto es para probar!), seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
4. Configuración de los parámetros de la bomba: haga clic con el botón derecho en el icono "Bomba", haga clic en la opción "Método" y configure el "Flujo": por ejemplo, 1,0 ml. /min; "¿Detener?
Tiempo": por ejemplo, 10 minutos (el tiempo de parada solo es necesario para realizar una muestra), seleccione la relación de flujo adecuada según sea necesario.
Luego, seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción.
5. Configuración automática de parámetros del muestreador: haga clic derecho en el icono "Muestreador", haga clic en la opción "Método" y seleccione "Volumen de inyección", ingrese.
Ingrese el volumen de muestra y seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción.
6. Configuración de los parámetros del horno de columna: haga clic derecho en "Horno de columna" y haga clic en "Configuración de método"; Temperatura "izquierda" (se puede configurar la escala de temperatura.
Perímetro: 10 ℃ -80 ℃ menos que la temperatura ambiente). Generalmente, las temperaturas de "izquierda" y "derecha" son las mismas. Simplemente seleccione "Fusionar" para vincular, "¿Detener?", seleccione "Como bomba/jeringa" y "Aceptar" para pasar a la siguiente opción;
7. Configuración de parámetros del detector UV: haga clic con el botón derecho en "Papá". , haga clic en la opción "¿Método?" e ingrese la longitud de onda de detección requerida en el espacio en blanco a continuación (puede seleccionar varias longitudes de onda según sea necesario, hasta 8 longitudes de onda, seleccione "Bomba/); Jeringuilla"; ¿"Espectro"?
——En la opción "Almacenamiento", seleccione "Ninguno" o "Todos" según sea necesario y seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente selección.
Elemento;
8. Después de editar el método, seleccione "Guardar método como" en el menú "Método", ingrese el nombre de la parte y luego seleccione "Aceptar" para salvar la fiesta.
La ley tiene éxito.
9. Inyección con una sola aguja
10. Desde el menú "Ejecutar control", seleccione la opción "Información de muestra" e ingrese el "Nombre del operador" en "Archivo de datos"; /p>
Seleccione la ruta y el prefijo/contador para configurar el prefijo y el contador.
Ingrese "Ubicación" y "Nombre de muestra", seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
11. Una vez que la línea de base esté estable, seleccione la opción "Ejecutar método" en "Ejecutar control" para iniciar la inyección.
4. Muestreo secuencial:
1. Seleccione la opción "Lista de secuencias" en el menú "Secuencia" y, en general, seleccione las opciones requeridas en el "Formulario de confirmación".
Son vial, nombre de la muestra, nombre del método e inyección/vial.
No.), "Tipo de muestra", "Archivo de datos" y "Volumen de inyección";
2. Haga clic en "Insertar" para generar una línea, establezca los parámetros anteriores y seleccione la línea. Haga clic en "Copiar" y "Pegar" para copiar y modificar los parámetros correspondientes, es decir,
generar una lista de secuencia, seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
3. Haga clic en el menú "Secuencia" En la opción "Parámetros de secuencia", seleccione la "Ruta" de los datos de la secuencia (la secuencia generará automáticamente una carpeta llamada "Nombre de secuencia-Hora" para guardar los datos). Se recomienda seleccionar "Prefijo/Contador" para guardar los datos;
Seleccione "Comando/Macro posterior a la secuencia" en la opción "Apagar" y seleccione "Apagar toda la bomba (Secuencia"). p>Apague las bombas después de la secuencia)"Luces apagadas""En espera" "Apague la lámpara UV después de la secuencia.
Y seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción; (Nota: si la "Ruta " se guarda en la unidad c de forma predeterminada, puede hacer clic en "Ver" para seleccionar.
Seleccione Preferencias y agregue las rutas de almacenamiento de plantilla de secuencia, datos y método principal adecuadas según sea necesario)
4. En el menú Secuencia, seleccione Convertir secuencia, Guardar plantilla como", ingrese un nombre de secuencia y seleccione "Aceptar".
5. Después de que la línea base esté estable, seleccione "Ejecutar secuencia". opción en "Ejecutar control" para iniciar la inyección secuencial.
(Nota: si la operación se detiene a mitad de camino, seleccione "Detener ejecución/inyección/secuencia" en "Ejecutar control" para conservar la información del mapa. Si elija,
Seleccione Cancelar, luego se perderá toda la información del mapa)
5. Análisis de datos (uso sin conexión):
1. LC1260 (sin conexión)" para ingresar a la pantalla sin conexión.
2. Desde " En el menú "Ver", haga clic en "Análisis de datos" para ingresar a la pantalla de análisis de datos.
3 Seleccione "Cargar señal" en el menú "Archivo", seleccione el nombre del archivo de datos requerido y haga clic en "Aceptar" para abrir Datos.
4. Menú "Gráficos".
Obligatorio. Complete el "Rango de tiempo" y el "Rango de respuesta" y seleccione "Aceptar"; seleccione "Eventos de integración" en "Integración" y realice ajustes.
En general, "Elección de área" y "Elección de altura" eliminan el desorden; haga clic en el ícono Establecer integración para eliminar selectivamente productos innecesarios.
Si desea cancelar esta acción, seleccione el quinto ícono de la izquierda en la fila superior de "Eventos manuales del método". Elimine, luego haga clic en el icono "√" a la izquierda para guardar los parámetros de integración del método y salir del "Evento de integración"
(Nota: "Establecer integración". El icono es )
6. Dibujo de curva estándar:
1. Seleccione "Nueva tabla de calibración" en el menú "Calibración" y seleccione "Nivel" en "Configuración automática"
Punto, el primer punto es 1)" y "Cantidad predeterminada", y seleccione "Aceptar";
2. Al seleccionar la opción "Agregar nivel" en el menú "Calibración", agregue cada parámetro de punto a su vez. Si es el método estándar externo, está en "ISTD".
Seleccione "No", si es el método estándar interno, seleccione "Sí" los números correspondientes al producto estándar y el producto estándar interno bajo "#" deben estar unificados; el punto correspondiente de la curva estándar
;
3 Seleccione la opción "Modo" del elemento "Recalibración" en el menú "Calibración" y seleccione "Promedio" para indicar. el punto actual y la calibración.
El valor promedio del punto correspondiente central reemplaza el punto correspondiente original en la regla. Si se selecciona "Reemplazar", significa que el punto actual reemplaza el punto correspondiente en la regla.
(Nota: Modificar "El método para cambiar la unidad de concentración en "Cantidad predeterminada" es seleccionar "Configuración de calibración" en "Calibración" y modificarla.
Cambie la "Unidad de cantidad" y configure el unidad de concentración; seleccione "Configuración de calibración" en "Calibración" y modifique "Predeterminado".
CalibrationCurve ", seleccione el tipo de curva apropiado - tipo, si pasa por el origen - el origen y la gravedad específica de cada punto a la curva estándar -
peso, generalmente igual )
4. Acceda al espectro de la muestra, haga clic en el pico cromatográfico cuya concentración debe calcularse, seleccione "Especificar informe" en el menú "Informe" y seleccione "Estilo de informe" como " Detalles". ", haga clic en "Aceptar" y luego seleccione el icono "Vista previa de impresión" para reflejar los resultados del cálculo en el informe.
Configuración de superposición de mapas:
1. Seleccione el menú "Archivo" En la opción "Superposición de señal", seleccione cualquier atlas que desee superponer;
2. En la opción "Señal", seleccione el icono "Superposición de señal 3D" (el cuarto icono de a la izquierda en la parte superior del atlas), aparecerá.
Ajuste el tiempo de intercalado y la altura en el cuadro de diálogo Ajustar opciones de superposición de señales; haga clic en el sexto gráfico si desea eliminar los espectros superpuestos. /p>
Marca.
8. Cálculo de la relación señal-ruido y otros parámetros:
1. Seleccione la opción "Editar rango de ruido" en "Adecuación del sistema". " en el menú "Informe" y establezca el intervalo de tiempo (más de.
1 minuto);
2. Seleccione "Especificar informe" en el menú "Informe" y seleccione " Estilo de informe" como "Perfecto + Ruido", haga clic en
Haga clic en "Aceptar" para obtener una vista previa de los parámetros de relación señal-ruido;
3. Seleccione "Especificar informe" en el cuadro " "Informe" y seleccione "Rendimiento extendido" para "Estilo de informe" y luego haga clic.
Haga clic en "Aceptar" para obtener una vista previa de todos los parámetros, como la simetría y los factores de cola.
9. Cuando el programa se está ejecutando, se detectan picos:
Seleccione la opción "Instantánea" en el menú "Archivo"
Imprimir informe:
1. Seleccione "Modo de informe" en el menú "Informe" y "Usar informe clásico"
2. Seleccione "Imprimir informe" en el menú "Informe" y se imprimirán los resultados del informe.
11. Apagar:
1. Después de limpiar la columna cromatográfica y el sistema, salga de la ventana Chemistry Workstation y apague la computadora. apague el interruptor de encendido de cada módulo de Agilent 1260.
Datos ampliados<. /p>
Definición: La cromatografía líquida es una tecnología de análisis de separación, que se caracteriza por utilizar líquido como fase móvil, y la fase estacionaria puede adoptar muchas formas, como papel, sábana, cama empaquetada, etc. En el desarrollo de la tecnología de cromatografía, para distinguir varios métodos, sus nombres se introdujeron en forma de fase estacionaria, como papel. cromatografía, cromatografía en capa fina y cromatografía líquida en columna.
Principio básico: Cuando se utiliza cromatografía líquida de alta resolución, el líquido a medir se inyecta en la columna cromatográfica y se mueve en fase estacionaria mediante presión.
La interacción entre diferentes sustancias y la fase estacionaria Las diferentes sustancias salen secuencialmente de la columna cromatográfica y son recogidas por el detector.
Diferentes señales de pico, y finalmente mediante el análisis y comparación de estas señales se determinan las sustancias contenidas en el objeto a detectar. La cromatografía líquida de alta resolución es un método analítico importante y se utiliza ampliamente en análisis químicos y bioquímicos. En principio, la cromatografía líquida de alta resolución es diferente de la cromatografía líquida clásica
No existe una diferencia esencial en los espectros. Se caracteriza por el uso de una bomba de infusión de alta presión, un detector de alta sensibilidad y una fase estacionaria de partículas de alta eficiencia, adecuada para analizar compuestos orgánicos con altos puntos de ebullición, altos pesos moleculares y diferentes polaridades.
El sistema HPLC consta principalmente de botellas de almacenamiento de fase móvil, bombas de infusión, muestreadores, columnas cromatográficas, detectores y registradores.
Todo el sistema es similar a la cromatografía de gases, pero con muchos ajustes. Se realizaron según las características del líquido como su fase móvil. Los requisitos de la bomba de infusión para cromatografía líquida de alto rendimiento
El volumen de infusión es constante y estable, y el sistema de muestreo requiere un muestreo conveniente y una conmutación estricta. Al mismo tiempo, dado que la viscosidad de la fase móvil líquida es mucho mayor que la del gas, para reducir la presión de la columna, las columnas de HPLC son generalmente más gruesas y mucho más cortas que las columnas de cromatografía de gases.
Materiales de referencia:
Enciclopedia Baidu-Cromatografía líquida