Técnicas de cultivo del almizcle

Cultivo de tejidos de rápida propagación

1. Nombre de la planta Adenosma glutinosum (L.)Druce].

2 Categoría de material Segmentos de vástago.

3. Condiciones de cultivo El MS es el medio básico. Medio de inducción de yemas axilares:

(1) MS 6-BA 0,25 mg·L-1 (las mismas unidades a continuación) IBA 0,5;

(2) MS 6-BA 0,5 IBA 0.5 .Medio de proliferación y fortalecimiento de plántulas;

(3)1/2MS 6-BA 0.2 IBA 0.1;

(4) 1/2MS 6-BA 0.5 IBA0.1. fortalecimiento Medio:;

(5) 1/2MS 6-BA 0.1. Medio de enraizamiento;

(6) 1/2MS. Los medios anteriores contienen 30 g·L-1 de sacarosa y 5,8 g·L-1 de agar, pH 5,8. La temperatura del cultivo es (25 ± 2) ℃; la intensidad de la luz es de aproximadamente 30 mmol·m-2·s-1 y el tiempo de luz es de 16 h·d-1.

4. Crecimiento y Diferenciación

4.1 Desinfección de Explantes y Cultivo Inicial Tome los segmentos de tallo joven de Almizcle, enjuáguelos con detergente durante 30 minutos, enjuáguelos con agua corriente durante 10 minutos, y luego remojar en alcohol 70 durante 10 segundos en una mesa de trabajo limpia, esterilizar con 0,1 HgCl2 durante 6 a 8 minutos, enjuagar con agua esterilizada 3 veces, usar papel de filtro esterilizado para absorber la humedad del material y cortarlo en un trozo de aproximadamente 1 cm con 1 sección. Los segmentos del tallo se inoculan en los medios de cultivo (1) y (2). Comienza a crecer después de aproximadamente 5 días de cultivo (Figura 1); el almizcle crece rápidamente, y después de 20 días de cultivo, las yemas axilares brotan y crecen cuando las yemas axilares crecen hasta 2 ~ 3 cm, se cortan y se cultivan; para la proliferación.

4.2 Cultivo de proliferación Después de que las yemas axilares se cultivaron en medio de proliferación (3) y (4) durante 20 días, el número de yemas que proliferaron alcanzó entre 3 y 5. Cuando las yemas tengan de 3 a 4 cm de largo, separe las yemas adventicias y córtelas en segmentos de tallo con 2 a 3 nudos o segmentos de tallo con yemas terminales para multiplicación y cultivo. Mediante repetidos traslados se obtuvo una gran cantidad de yemas agrupadas (Figura 2). 20 días es un ciclo de sucesión y el coeficiente de proliferación alcanza aproximadamente 4.

4.3 Cultivo de enraizamiento de plántulas fuertes Cuando los brotes agrupados crezcan entre 3 y 4 cm, córtelos individualmente y transfiéralos al medio de plántulas fuertes (5) para su cultivo. las plántulas crecerán fuertes (Figura 3). Luego transfiéralo al medio de enraizamiento (6) y comenzarán a aparecer nuevas raíces después de 10 días de cultivo. Continúe el cultivo durante 15 días, se producirá una gran cantidad de raíces finas y la tasa de enraizamiento alcanzará más del 95%; . Las plántulas pequeñas se pueden trasplantar cuando tengan de 4 a 5 pares de hojas, una altura de 5 a 8 cm y una longitud de raíz de 3 a 5 cm (Figura 4).

4.4 Endurecimiento y trasplante de plántulas: Endurezca las plántulas cuando tengan entre 5 y 8 cm de altura y tengan raíces fibrosas bien desarrolladas. Antes de trasplantar, abra la tapa de la botella de cultivo y coloque las plántulas en condiciones de luz natural y ventilación durante todo el día de 25 °C durante 7 a 10 días. Luego abra la tapa de la botella y cultive durante 3 a 5 días. Al trasplantar, use pinzas para sacar las plántulas del tubo de ensayo de la botella de cultivo, lave el medio de cultivo de raíces y trasplante a suelo nutritivo esterilizado (turba: perlita: vermiculita = 1:2:1). Mantenga la tierra nutritiva húmeda entre 7 y 10 días después del trasplante y use una película plástica para hidratar. La humedad del aire es superior al 85%. Después de eso, rocíe agua una vez al día. Aparecerá un nuevo crecimiento en aproximadamente 15 días. La tasa será superior al 90%.