Análisis de factores comunes que afectan las pruebas bioquímicas

Además de las enfermedades, hay muchos factores que también afectan los resultados de las pruebas bioquímicas. Estos factores pueden estar bajo análisis. El siguiente es el conocimiento que les aporto sobre el análisis de factores de influencia comunes en las pruebas bioquímicas. Bienvenido a leer.

Factores preanalíticos

Los factores preanalíticos están relacionados con factores como el propio paciente, la recogida de muestras y el procesamiento de muestras, y suelen afectar a la composición de las muestras de fluidos corporales preanalíticas. Incluyendo los siguientes aspectos:

Factores biológicos: Factores inherentes a los pacientes y estudiantes que pueden ser controlados.

Factores abióticos: incluida la recogida de muestras, el procesamiento, el almacenamiento y el uso de anticoagulantes.

Factores en análisis

Los factores en análisis son factores que pueden afectar el proceso de análisis.

Factores interferenciales: hiperlipidemia, hemólisis, ictericia, hiperalbuminemia, fármacos. Hay más.

Control de calidad: garantizar la precisión de las operaciones y resultados de las pruebas.

Después del análisis, estos factores implican diferentes formas de presentar, almacenar y transmitir datos de laboratorio a los médicos.

Siempre que sea posible, intente controlar los tres factores anteriores para reducir el impacto en los resultados experimentales.

1. Factores preanalíticos

Antes de analizar la muestra en el laboratorio, los factores preanalíticos afectarán a la composición de la muestra (afectando así a la calidad de la muestra).

Estos factores son las fuentes de error más importantes y comunes en los análisis de laboratorio, pero a menudo se ignoran al analizar datos experimentales.

Estos factores deben controlarse al máximo para reducir el impacto en los resultados experimentales. Los factores que controlan el preanálisis incluyen la recolección, preparación y manipulación adecuada de las muestras por parte de un veterinario o técnico. Por supuesto, también existen algunos factores incontrolables. Por ejemplo, al evaluar las consecuencias de una enfermedad, se deben considerar y reconocer las diferencias genéticas y fisiológicas de las especies.

Los factores preanalíticos incluyen factores bióticos y abióticos.

1.1 Factores biológicos

Algunos factores son inherentes a los animales, como la raza, la edad y el sexo. Sin embargo, esto debe tenerse en cuenta al evaluar los resultados de las pruebas. Recuerde, la mayoría de los valores de referencia proporcionados por los laboratorios se aplican a animales adultos sanos. Los veterinarios pueden controlar otros factores fisiológicos, como asegurarse de que el animal haya estado en ayunas durante 12 horas a la hora de preparar las muestras de sangre.

Factores biológicos inherentes en 1.1.1

Especies: la especificidad de la especie da como resultado diferencias significativas en las fuentes y resultados analíticos. Por ejemplo, la alanina aminotransferasa es una enzima específica del hígado de animales pequeños pero no de animales grandes. Por tanto, los resultados bioquímicos de los animales deben compararse con intervalos de referencia para la misma especie. Por ejemplo, los intervalos de referencia para caballos no se pueden utilizar para analizar resultados bioquímicos para burros.

Variedad: existen diferencias relacionadas con los cultivares en los análisis bioquímicos, pero estas diferencias son generalmente pequeñas. Los caballos sanos generalmente tienen valores de creatina quinasa más altos que los pura sangre.

Edad: Muchos componentes de los análisis bioquímicos cambian con la edad, y los resultados bioquímicos en animales jóvenes a menudo cambian, no debido a una enfermedad, sino a la edad. Por ejemplo, la fosfatasa alcalina es alta en todos los animales jóvenes. En general, los rangos de referencia proporcionados por los laboratorios de patología clínica están determinados principalmente para animales adultos y no son adecuados para animales jóvenes.

Género: En condiciones no patológicas, el estado fisiológico de las hembras relacionado con la gestación o la lactancia puede afectar a los resultados del análisis. En algunas especies, pueden existir intervalos de referencia separados para diferentes sexos, por ejemplo, el hierro sérico en humanos. En general, hay pocos sesgos de detección relacionados con el sexo en el ganado.

1.1.2 Factores biológicos controlables

La estandarización de la tecnología de recolección de muestras puede minimizar el impacto de estos factores en los resultados de las pruebas bioquímicas. Si estos factores son inevitables o necesarios (por ejemplo, recolectar muestras después del ejercicio para detectar rabdomiolisis en caballos), estos factores deben considerarse durante el análisis de los resultados.

Ingesta reciente de alimentos: Puede provocar hiperlipidemia posprandial. La lipidemia puede afectar los métodos de medición y análisis de ciertos componentes del plasma, invalidando los resultados. La hiperlipidemia posprandial se puede evitar ayunando durante 12 horas y recogiendo muestras adecuadas.

De hecho, el aumento de la hiperlipidemia después del ayuno es una evidencia favorable de anomalías en el metabolismo de los lípidos secundarias a la enfermedad.

Las comidas recientes pueden afectar las concentraciones de algunos componentes plasmáticos no relacionados con la hiperlipidemia, como la glucosa. Este efecto depende claramente de la especie debido a las diferencias en el metabolismo de los alimentos (por ejemplo, en comparación con los rumiantes).

Estrés: El estrés (secundario al manejo de animales o a enfermedades subyacentes) puede tener un gran impacto en los resultados de laboratorio. Es particularmente importante abordar el estrés en animales jóvenes o no acostumbrados, y se deben tomar muestras de sangre para reducir el estrés en los animales.

Ejercicio: El efecto del ejercicio sobre la composición plasmática depende del tipo e intensidad del ejercicio. Generalmente, las muestras de sangre se recolectan antes de ejercitar a los animales.

Fármacos: El método de administración, como la administración intramuscular, afectará directamente a los resultados del análisis. Los propios fármacos también pueden interferir con la medición de los analitos.

1.1.3 Interferencia de fármacos

Se pueden dividir en dos categorías: efectos fisiológicos de los fármacos (in vivo) o efectos de los metabolitos sobre los analitos.

In vitro, algunas propiedades físicas o químicas de los fármacos y sus metabolitos también pueden interferir con el proceso de detección real. Las terapias que pueden interferir significativamente con la prueba son los transportadores de oxígeno similares a la hemoglobina (HBOC), como el potenciador de la sangre oxihemoglobina. Es una hemoglobina polimerizada de color negro-rojo que se encuentra en el suero bovino. Debido al color inherente de este compuesto, la oxihemoglobina puede causar la misma situación que la hemólisis del plasma/suero en el tratamiento de animales anémicos. Tiene una interferencia significativa con los resultados de las pruebas de hematología, bioquímica y orina. La interferencia de las pruebas bioquímicas depende del método de detección y del uso del instrumento. Los fabricantes están trabajando para desarrollar nuevos métodos para compensar o eliminar la interferencia de los HBOC, de modo que en el futuro se puedan obtener resultados precisos de las pruebas en animales a los que se les administren HBOC. Esto sugiere que se deben recolectar muestras de sangre antes de administrar HBOC a animales anémicos para minimizar el impacto en los resultados de las pruebas.

Se debe informar al laboratorio del uso de cualquier fármaco terapéutico para que se puedan tomar medidas para reducir los efectos de los mismos. Sin embargo, aparte de ejemplos como los corticosteroides y los bromuros, se sabe poco sobre los efectos de los fármacos en animales o sobre las técnicas analíticas en medicina veterinaria. Por lo tanto, cualquier resultado anormal de las pruebas bioquímicas debe analizarse junto con el historial completo de medicación del animal.

1.2 Factores no fisiológicos

Los factores no fisiológicos incluyen la recolección, el procesamiento y el transporte de muestras. Estos factores deben controlarse tanto como sea posible para reducir el impacto en los resultados de laboratorio.

1.2.1 Recogida de muestras

Venopunción: La venopunción limpia es una de las condiciones importantes para reducir los errores humanos. Una técnica de punción venosa inadecuada puede provocar hemólisis, lo que provoca que los resultados de las pruebas sean erróneos de muchas maneras. Por ejemplo, los glóbulos rojos con alto contenido de potasio provocarán un aumento falso de potasio, la AST en los glóbulos rojos provocará un aumento falso de AST (como en los gatos) y las reacciones químicas durante el proceso de detección liberarán componentes relevantes, lo que provocará a un falso aumento de CK. El factor tisular producido por una punción venosa incorrecta durante una prueba de hemostasia puede contaminar la muestra, hacer que el precipitado se coagule en el tubo de muestra y extender o acortar la medición del tiempo de coagulación de una manera impredecible. La recolección de sangre directamente en anticoagulante citrato (jeringa precargada o directamente en tubos vacutainer) puede reducir el impacto del error.

Anticoagulantes: Los anticoagulantes pueden afectar los resultados de las pruebas.

Análisis de sangre: Lo mejor es utilizar EDTA como anticoagulante. El citrato diluirá la muestra y la heparina provocará la aglutinación celular, los cuales reducirán el recuento.

Pruebas bioquímicas: Las muestras de plasma o suero heparinizado (sin anticoagulante) son adecuadas para pruebas bioquímicas. Porque los resultados de las pruebas de plasma y suero del mismo paciente son diferentes. Por lo tanto, si se requiere un seguimiento seriado del mismo paciente, se debe utilizar la misma muestra. El fibrinógeno está contenido en el plasma, pero no en el suero (se elimina durante la coagulación), por lo que la proteína total (y la globulina) en el plasma se mide en los resultados de la prueba, porque ¿el fibrinógeno está contenido en el plasma? globulina) superior a la del suero. Las plaquetas liberan potasio durante el proceso de coagulación, por lo que el potasio sérico es más alto que el potasio plasmático (este último resultado es más preciso). Los anticoagulantes fluorooxalato se utilizan para medir la glucosa, que inhibe el metabolismo celular. El suero/plasma debe separarse de las células inmediatamente ya que este anticoagulante puede provocar hemólisis grave.

Los anticoagulantes citrato y EDTA no son adecuados para pruebas bioquímicas porque quelan cationes divalentes (calcio, magnesio) y contienen altas concentraciones de sodio (citrato) o potasio (EDTA). Incluso las muestras de sangre ligeramente contaminadas con EDTA mostrarán resultados de potasio ultra alto y calcio ultra bajo. Algunas enzimas también requieren cationes divalentes para su actividad. Por lo tanto, los resultados de las pruebas para estas enzimas (como la fosfatasa alcalina) serán falsamente bajos en plasma que contiene EDTA o citrato como anticoagulante.

Prueba de coagulación: Lo mejor es utilizar anticoagulante de ácido cítrico (tiene un ligero efecto quelante sobre el calcio, por lo que el calcio puede devolverse a la muestra para medir la coagulación). No se puede usar heparina (la muestra no coagulará), pero se puede usar EDTA (la muestra puede devolver calcio), pero no es muy confiable y no se recomienda.

1.2.2 Procesamiento y almacenamiento de muestras

Después de la recolección de la muestra, se debe prestar estricta atención al manejo de la muestra para minimizar el impacto de estos factores en los resultados.

Separación: Siempre que sea posible, especialmente cuando hay un retraso entre la recolección de la muestra y el examen de laboratorio, el suero o plasma debe separarse de las células lo antes posible después de la recolección de la muestra. Incluye muestras de coagulación (para suero) y muestras de centrifugación para separar los componentes sanguíneos. El suero o plasma debe separarse de las células y colocarse en tubos nuevos aglutinados (sin anticoagulante). ¿Debería marcarse el oleoducto como? ¿Plasma? ¿aún? ¿suero? . Para las muestras que no están separadas de las células, la concentración de glucosa es baja (consumida por las células durante el almacenamiento) e incluso si no hay hemólisis obvia, algunos componentes de alta concentración se escaparán de los glóbulos rojos, como el potasio. en sangre de caballo. Un tubo separador de suero (o Corvac) está hecho de silicona y separa el suero del coágulo. Incluso si se utilizan estos tubos, aún es necesario retirar el suero y colocarlo en un nuevo coágulo, especialmente si el tubo especial no es nuevo (si la silicona tiene grietas, esto también afectará a la muestra).

Etiquetado: Todas las muestras de fluidos corporales de los pacientes deben etiquetarse adecuadamente con el nombre del paciente, su identidad y el tipo de muestra (p. ej., suero, plasma, líquido sinovial y líquido peritoneal). El laboratorio no se responsabiliza del correcto etiquetado de las muestras. Como se puede imaginar, una muestra mal etiquetada puede tener consecuencias graves y perjudiciales para la atención del paciente.

Almacenamiento: Generalmente, hay un retraso de al menos 24 horas entre la recolección de la muestra y el análisis de laboratorio. Por lo tanto, es esencial separar rápidamente el suero/plasma de las células y mantener las muestras frías (usando bolsas de hielo) para maximizar la actividad enzimática y evitar resultados erróneos. Si se espera un período de tiempo mayor (>24 horas), se recomienda congelar la muestra y transportarla al laboratorio en hielo seco. El método de almacenamiento de muestras depende del tipo de muestra que se analiza. Algunas muestras no son muy estables cuando se congelan, por lo que siempre debe preguntar al laboratorio sobre el método de almacenamiento de las diferentes muestras.

2. Análisis factorial

Los factores en el análisis afectarán el proceso del instrumento que mide el analito. Diferentes laboratorios tendrán diferentes efectos en los resultados de las pruebas debido a los diferentes tipos de instrumentos. Los factores analíticos son causados ​​por propiedades inherentes de la muestra, como la interferencia de los lípidos en sangre o las características inherentes del propio analizador. El programa de garantía de calidad de un laboratorio puede minimizar los errores en el propio instrumento.

Dificultad

Hibridemia, hemoglobina libre (hemólisis), ictericia (hiperbilirrubinemia), hiperglobulina y fármacos, estas sustancias endógenas interfieren con los resultados de la prueba. El alcance depende del tipo de instrumento, detección. método y la cantidad de sustancias que interfieren en la muestra (es decir, especificidad de laboratorio). Los analizadores químicos utilizados en el Laboratorio de Patología Clínica de la Universidad de Cornell miden los niveles de hiperlipidemia, hemólisis e ictericia en muestras y utilizan estos valores como indicadores para evaluar el impacto de estas tres sustancias endógenas que interfieren en los resultados químicos.

Hiperalbuminemia: Las inmunoglobulinas monoclonales (proteínas auxiliares), especialmente cuando están presentes en altas concentraciones, interfieren con el análisis bioquímico a través de los siguientes mecanismos:

Alta viscosidad: afecta el volumen de la muestra, la viscosidad depende de el tipo de inmunoglobulina (¿cómo y por qué la inmunoglobulina forma una alta viscosidad?)

Unión a la sustancia a detectar: ​​La inmunoglobulina se une a ciertas sustancias a detectar Aumentará o disminuirá los componentes analizados. Por ejemplo, se ha encontrado hiperfosfatemia en casos de leucemia linfocítica crónica canina y gammaglobulinemia monoclonal IgM canina.

Cambio de volumen: Es similar al efecto de la hiperlipidemia.

¿Qué enfermedad causa la gammaglobulinemia monoclonal?

Fármacos: La interferencia de fármacos por diferentes métodos de administración puede sesgar los resultados. Una de las interferencias farmacológicas más comunes en la medicina veterinaria es la terapia con bromuro canino (anticonvulsivo), en la que el valor de cloruro de la muestra de prueba se eleva artificialmente. Los veterinarios clínicos deben informar al laboratorio sobre cualquier medicamento utilizado en los animales que se están probando. Esto puede ayudar a reducir (pero generalmente no eliminar) los efectos de los medicamentos en las pruebas químicas.

Procedimientos de inspección

Controlar y minimizar los factores que afectan el rendimiento del ensayo incluye el aseguramiento de la calidad.

El objetivo del laboratorio de patología clínica es proporcionar resultados exactos y precisos. La garantía de calidad se logra mediante la implementación de procedimientos operativos de laboratorio y procedimientos de control de calidad claros.

Los procedimientos de control de calidad dependen de la medición de la concentración del analito en el suero de control de calidad (en comparación con los valores de analito predeterminados). Los valores de control de calidad que exceden los límites predeterminados (aceptación) generalmente indican un problema con el procedimiento. Las pruebas de control de los instrumentos analíticos se realizan diariamente en el Laboratorio de Patología Clínica de la Universidad de Cornell. No se analizarán muestras de pacientes a menos que los valores del control de calidad estén dentro de límites aceptables. Además, cuando un laboratorio participa en un programa de control de calidad externo y analiza una muestra desconocida, compara los resultados con los de otros laboratorios que utilizan el mismo instrumento. Si los resultados de nuestro laboratorio se desvían significativamente del promedio, esto indica un problema de procedimiento que debe corregirse de inmediato.

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