Ámbito de aplicación de la electroforesis en gel de agarosa

La electroforesis en gel de agarosa es un método estándar para separar, identificar y purificar fragmentos de ADN. La agarosa es un polisacárido extraído del agar. Es hidrófilo pero no tiene carga y es un buen soporte para la electroforesis. El ADN se carga negativamente en condiciones alcalinas (tampón de pH 8,0) y se mueve hacia el electrodo positivo a través del medio de gel en el campo eléctrico. Diferentes fragmentos de moléculas de ADN nadan a diferentes velocidades en el campo eléctrico debido a diferentes moléculas y configuraciones. El bromuro de etidio (EB) se puede incrustar entre los pares de bases de las moléculas de ADN para formar complejos fluorescentes. Después de la irradiación ultravioleta, se pueden separar diferentes bandas para lograr el propósito de separación, identificación del peso molecular y detección de recombinantes.

(Según el contenido de agarosa 0,3-1,5, utilice 1 gel para ADN de 1-25 kb, 0,5 gel para ADN de 20-100 kb y 1,5 para ADN de 200-2000 pb.