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¿Es necesario utilizar estándares al realizar una curva estándar con ácido D-galacturónico?

El uso de ácido D-galacturónico como curva estándar requiere un estándar.

Entre las plantas comestibles, muchas verduras y frutas contienen pectina, que también es un compuesto polimérico con componentes químicos como el ácido galacturónico. La pectina se hidroliza para producir ácido péctico y ácido de frutas. Una característica importante de la pectina es la gelificación (congelación). Existen tres métodos de determinación: método gravimétrico, método colorimétrico y método volumétrico.

(1) Método gravimétrico

1. Principio: Aprovechando las propiedades insolubles de la pectina cálcica en agua, primero extraiga la pectina de la muestra, luego agregue precipitante para precipitar y mida. el peso. Convertir al peso de pectina. Agente precipitante + pectina → pectato de calcio.

Se utilizan dos precipitantes:

Dieléctrico: Nacl Cacl2

Soluciones orgánicas: metanol, etanol y acetona.

Cuando el grado de esterificación del ácido poligalacturónico es del 20%, se utiliza Nacl como agente precipitante del ácido péctico, que tiene poca solubilidad en agua y es fácil de precipitar.

Cuando el grado de esterificación del ácido poligalacturónico es del 50%, Cacl2_2 se utiliza como agente precipitante del ácido péctico, que es altamente soluble en agua y difícil de precipitar.

Cuando el grado de esterificación del ácido poligalacturónico es del 100%, se utiliza un disolvente orgánico como agente precipitante.

Esto muestra que el ácido poligalacturónico tiene un alto grado de esterificación, alta solubilidad en agua, alto grado de esterificación y alta concentración de alcohol.

2. Método:

Pesar 30-50 g (5-10 g de muestra seca) en un vaso de precipitados de 250 ml → añadir 150 ml de agua → hervir durante 1 hora (se evitará agitación e hidrólisis). pérdidas). →Enfriar → Diluir a volumen → 250 ml → Filtración por succión → Aspirar 25 ml de filtrado → Colocar en un vaso de precipitados de 500 ml → Agregar 100 ml de NaOH 0,1 N → Dejar durante 30 min → Agregar 50 ml de ácido acético 1 N → Agregar 50 ml de Cacl2 2 N → Dejar durante 1 hora → Hervir durante 5 min → Hornear con papel filtro hasta peso constante.

3. Cálculo:

% pectina = (0,9235× g)/(ancho×25/250)×100

0,9235: de pectina calcio Convertir igual cantidades de pectina.

g: Peso del residuo del filtro, g

w: Peso de la muestra, g

(2) Método volumétrico (método de valoración por destilación)

1. Principio

La pectina soluble en agua está compuesta por arabinosa y pectato de calcio. El contenido de pectina se puede calcular midiendo la fracción característica de arabinosa.

La mezcla de bromo libera bromo bajo la acción del Hcl y luego reacciona con furfural. El bromo restante reacciona con yoduro de potasio para precipitar yodo, que puede valorarse con sulfito de sodio para calcular la cantidad de furfural.

Paso 2

Pesar 10g de la muestra triturada → colocarla en un matraz de 250ml → añadir 100ml de HCl al 12% (gravedad específica 1,06). →Conectar el tubo del condensador y el embudo de destilación a la botella →Calentar el destilado en un baño de agua a 140-150°C y colocarlo en una probeta graduada →Añadir 30 ml de Hcl al 12% al matraz a través del embudo →Continuar destilación → Mantenga el volumen en la botella → Saque el destilado sin furfural (1d)

Agregue 12% Hcl al destilado para hacer el volumen total 300 ml → Saque 100 ml → Agregue 25 ml de solución mixta de bromo → Ponlo reservar 1 hora → proteger de la luz → agregar 10 ml de yoduro de potasio al 15 % → usar indicador de almidón 0,1 d.

Cálculo

Goma de fruta = (n(v2-v 1)×0,024×3,7)/w×100.

1ml de solución de bromo 0,024:1N equivale a la cantidad de furfural, g.

3.7: En condiciones normales de destilación, el furfural se convierte en una cantidad igual de pectina.

w: La cantidad de solución de muestra equivalente a la muestra, g

n: La concentración normal de solución estándar de tiosulfato de sodio

V1: Tiosulfato de sodio El volumen consumido por la titulación en blanco de la solución estándar, ml.

V2: Volumen consumido por la solución estándar de tiosulfato de sodio en la solución de muestra, ml.

(3) Método colorimétrico

El método se basa en la hidrólisis de la pectina y el carbazol se condensan en un ácido fuerte, y luego la solución de color rojo púrpura se analiza mediante colorimetría. Método de determinación cuantitativa. La sustancia de color rojo púrpura es proporcional a la concentración de ácido galacturónico.

Funcionamiento:

A. Preparar una curva estándar para ácido galacturónico.

B. Extraer la pectina de la muestra y ajustar el volumen a 100ml.

c. Medir la absorbancia y comprobar la curva para obtener el contenido de ácido galacturónico.

% de pectina total = (ácido galacturónico (μg/ml) × 100)/(gramos de muestra × 10/200 × 10000).