Después de realizar una electroforesis en gel de agarosa, ¿por qué la banda de ADN tiene un color claro?

Después de la electroforesis en gel de agarosa, ¿por qué la banda de ADN tiene un color claro?

Las razones son las siguientes:

1. impuro, el producto objetivo no es muy diferente de la banda miscelánea, por lo que lleva un tiempo correr para obtener la cola. Consulte el marcador. No debería haber ningún marcador. Si es así, significa que hay un problema con el pegamento.

2. Para detectar ADN en agarosa, utilice generalmente de 1 a 5 microlitros de la solución original y agregue 2 microlitros de azul de bromofenol.

3. puede ser la concentración de la solución original causada por ser demasiado grande;

4.

5. Realizar cierto tratamiento decolorante sobre la muestra antes de la extracción. Muy sencillo. Existe una especie de buffer TENP, que se puede encontrar en la literatura.

6. Degradación del ADN para evitar la contaminación por nucleasas.

7. Si la cantidad de ADN cargado es demasiada, se puede reducir la cantidad de ADN cargado en el gel.

8. Si las condiciones de electroforesis utilizadas no son adecuadas, el voltaje durante la electroforesis no debe exceder los 20 V/cm y la temperatura debe ser <30 °C. Para cadenas de ADN grandes, la temperatura debe ser <15 °C. °C Compruebe si el tampón de electroforesis utilizado tiene suficiente capacidad de amortiguación.

9. La muestra de ADN contiene demasiada sal. El exceso de sal se puede eliminar mediante precipitación con etanol antes de la electroforesis.

10. Si hay contaminación proteica, se puede utilizar la extracción con fenol para eliminar la proteína antes de la electroforesis.

11. Desnaturalización del ADN, no calentar antes de la electroforesis, diluir el ADN con tampón NaCl 20mM