Extracción y determinación de pectina en frutos ¿Por qué es necesario pesar 0,1,205 g de ácido galacturónico acuoso al preparar una solución estándar?
(1) Método gravimétrico
1. Principio: aprovechando la propiedad de la pectina cálcica de ser insoluble en agua, primero extraiga la pectina de la muestra, luego agregue precipitante para precipitar y medir el peso. Convertir al peso de pectina. Agente precipitante pectina → pectato cálcico
Utilizar dos agentes precipitantes:
Dieléctrico: NaCl CaCl 2;
Solución orgánica: metanol, etanol y acetona.
Cuando el grado de esterificación del ácido poligalacturónico es 20, se utiliza Nacl como agente precipitante del ácido péctico, que tiene poca solubilidad en agua y es fácil de precipitar.
Cuando el grado de esterificación del ácido poligalacturónico es 50, Cacl2_2 se utiliza como agente precipitante del ácido péctico, que es altamente soluble en agua y difícil de precipitar.
Cuando el grado de esterificación del ácido poligalacturónico es 100, se utiliza un disolvente orgánico como agente precipitante.
Esto muestra que el ácido poligalacturónico tiene un alto grado de esterificación, alta solubilidad en agua, alto grado de esterificación y alta concentración de alcohol.
2. Método:
Pesar 30-50g (5-10g de muestra seca) en un vaso de precipitados de 250ml → añadir 150ml de agua → hervir durante 1 hora (revolver e hidrolizar para evitarlo). pérdidas) → enfriar → Sedimentación → 250 ml → Filtración por succión → Aspirar 25 ml → Poner el filtrado en un vaso de precipitados de 500 ml → Añadir 0,65438. →Agregar 50ml 2n CaCl 2→Ponlo durante 1 hora →Hervir durante 5min →Filtro con papel de filtro seco hasta peso constante →Lavar con agua caliente hasta que no quede Cl-→Agregar papel de filtro y residuo →Cocer en pesaje de peso constante hasta peso constante → 105 ℃.
3. Cálculo:
Pectina = (0,9235× g)/(ancho×25/250)×100
0,9235: Conversión de pectina cálcica de igual cantidades de pectina.
g: Peso del residuo del filtro, g
w: Peso de la muestra, g
(2) Método volumétrico (método de valoración por destilación)
1. Principio
La pectina soluble en agua está compuesta por arabinosa y pectato de calcio. El contenido de pectina se puede calcular midiendo la fracción característica de arabinosa.
La mezcla de bromo libera bromo bajo la acción del Hcl y luego reacciona con furfural. El bromo restante reacciona con yoduro de potasio para precipitar yodo, que puede valorarse con sulfito de sodio para calcular la cantidad de furfural.
Paso 2
Pesar 10 g de la muestra triturada → colocarla en un matraz de 250 ml → añadir 100 ml de 12 HCl (gravedad específica 1,06) → conectar el tubo del condensador y el embudo de decantación al botella →Calentar agua destilada en un baño de agua a 140-150 ℃. Destilar → mantener el volumen en la botella → hasta que el destilado no contenga furfural (el destilado se puede colocar en papel de filtro durante 1 día y se puede agregar gota a gota una solución de prueba de acetato de anilina durante 1 día al lado. Se pondrá roja cuando furfural está presente).
Añadir 12 Hcl al destilado para obtener un volumen total de 300 ml → sacar 100 ml → añadir 25 ml de solución mixta de bromo → dejar actuar 1 hora → proteger de la luz → añadir 10 ml de yoduro de potasio 15 → utilizar 0,1 d de almidón indicador.
Cálculo
Goma de fruta = (n(v2-v 1)×0,024×3,7)/w×100.
0,024: 1ml de solución de bromo 1n equivale a la cantidad de furfural, g.
3.7: En condiciones normales de destilación, el furfural se convierte en una cantidad igual de pectina.
w: La cantidad de solución de muestra equivalente a la muestra, g
n: La concentración normal de solución estándar de tiosulfato de sodio
V1: Tiosulfato de sodio El volumen consumido por la titulación en blanco de la solución estándar, ml.
V2: Volumen consumido por la solución estándar de tiosulfato de sodio en la solución de muestra, ml.
(3) Método colorimétrico
El método se basa en la hidrólisis de la pectina y el carbazol se condensan en un ácido fuerte, y luego la solución de color rojo púrpura se analiza mediante colorimetría. Método de determinación cuantitativa. La sustancia de color rojo púrpura es proporcional a la concentración de ácido galacturónico.
Operación:
A. Curva estándar de ácido galacturónico auxiliar
b. Extraer el material de pectina de la muestra y ajustar el volumen a 100 ml.
c. Medir la absorbancia y comprobar la curva para obtener el contenido de ácido galacturónico.
Cantidad total de pectina = (ácido galacturónico (μg/ml) × 100)/(gramos de muestra × 10/200 × 10000)
Materiales de referencia:
/jianyan/Lihua/shipinfenxi/11837.html