¿Cómo hacer electroforesis en gel de agarosa al 1%?

Preparación de gel de agarosa al 1,1% (70 ml para gel grande, 50 ml para gel pequeño): Pesar 0,7 g (0,5 g) de agarosa en un matraz Erlenmeyer, añadir 70 ml (50 ml) 1 × tae, girar el frasco boca abajo y calentar en el microondas. Hervir 3 veces hasta que la agarosa se derrita por completo.

2. Preparación de la película: limpie el tanque interno de vidrio orgánico (tanque de fabricación de gel) en el tanque de electroforesis, séquelo y colóquelo en la placa de vidrio de fabricación de gel. Use cinta transparente para sellar los bordes de la placa de vidrio y el recipiente interior para formar un molde. Coloque la ranura interior en posición horizontal y coloque el peine en una posición fija. Mezcle la solución de gel de agarosa que se ha enfriado a aproximadamente 65 °C, viértala con cuidado en la placa de vidrio del tanque interior y extienda lentamente el pegamento hasta que se forme una capa adhesiva uniforme en toda la superficie de la placa de vidrio.

3. Déjelo a temperatura ambiente hasta que el gel esté completamente solidificado, tire suavemente del peine verticalmente, retire la cinta y coloque el gel y el tanque interior en el tanque de electroforesis. Agregue tampón de electroforesis 1×TAE hasta que no atraviese la placa de goma.

Datos ampliados:

Temperatura de almacenamiento: temperatura ambiente

Existen muchos nombres comerciales, como Sepharose (Suecia, pharmacia), Bio-Gel-A ( Bio-Rad, EE. UU.) )etc. El gel de agarosa se basa en cadenas secundarias entre cadenas de azúcar, como los enlaces de hidrógeno, para mantener una estructura de red. La densidad de la estructura de red depende de la concentración de agarosa. En términos generales, su estructura es estable y se puede utilizar en muchas condiciones (como agua, soluciones salinas en el rango de pH 4-9).

El gel de agarosa comienza a fundirse por encima de los 40°C y no puede esterilizarse mediante alta presión. Puede tratarse con esterilización química.

La agarosa, abreviada como Ag, es un componente neutro no cargado del agar, también traducido como agar o agarosa. La estructura química de la agarosa está compuesta por unidades de β-D-galactopiranosa (1-4) y 3,6-deshidratada de α-L-galactopiranosa.

La agarosa, es decir, agar cuyo componente principal es el polisacárido y casi no contiene radicales sulfato, se disuelve en agua caliente y se enfría hasta formar un gel. Las pequeñas partículas preparadas se utilizaron para la filtración en gel. Es adecuado para la filtración en gel de macromoléculas, partículas celulares, virus, etc. que no pueden fraccionarse con gel de dextrano. El fraccionamiento también es posible si se utiliza un gel con una concentración inferior al 5%.

Debido a sus bajas propiedades de adsorción, en ocasiones se utiliza en lugar del agar como soporte para reacciones de inmunoelectroforesis o precipitación en gel.

Materiales de referencia:

Enciclopedia Baidu-Gel de agarosa