¿Por qué las células necesitan ser hipotónicas al preparar muestras de cromosomas?

En un entorno de baja permeabilidad, las células tienden a absorber agua y explotar en preparación para la tinción posterior. Además, la duración del tiempo de baja permeabilidad está relacionada con la calidad del cromosoma; dispersión. Sin tiempo, los cromosomas están poco dispersos, pero con el tiempo hipotónico, los cromosomas están excesivamente dispersos o incluso se pierden.

2. Significado de la fijación:

Después de agregar el fijador, la suspensión de células hipotónicas cambia de color. Después de la fijación, las células sanguíneas mueren rápidamente, la hemoglobina queda expuesta y los iones ferrosos se oxidan rápidamente. Rojo intenso. Sustancia marrón, por lo que parece descolorido. La fijación mantiene la estructura celular lo más prístina posible y también facilita la observación.

Datos ampliados:

Notas sobre la preparación de muestras de cromosomas:

1. La temperatura del cultivo debe controlarse estrictamente a 37±0,5°C, y la óptima. El pH del medio de cultivo es 7,2-7,4.

2. Si el tiempo de tratamiento con colchicina es demasiado largo, habrá más células en división y cromosomas más cortos, de lo contrario, las células serán pocas y alargadas; No apto para observar formas y contar. Por tanto, es necesario controlar con precisión la concentración y el tiempo de colchicina.

3. La hipotonicidad provoca rotura de la membrana de los eritrocitos y expansión de los linfocitos. La concentración y el tiempo del tratamiento hipotónico deben ser adecuados. Además, las células mixtas deben tratarse con suavidad después del tratamiento hipotónico, de lo contrario la membrana se romperá y se perderán los cromosomas.

4. Equilibrio antes de la centrifugación. Si la velocidad de centrifugación es demasiado rápida, el grupo de células no se romperá fácilmente; de ​​lo contrario, las células se perderán fácilmente.

5. El fijador debe prepararse temporalmente antes de su uso.

6. El portaobjetos debe estar limpio, de lo contrario los cromosomas no quedarán bien dispersos.