¿Existen otros métodos para medir los azúcares reductores en el licor además de utilizar un fotómetro de paisaje?
Después de eliminar la proteína de la muestra, el azúcar reductor reduce la sal de cobre a óxido cuproso en un ambiente alcalino. Después de agregar sulfato de hierro, el óxido cuproso se oxida a sal cuprosa. La sal ferrosa generada después de la oxidación se titula con una solución de permanganato de potasio. El contenido de isomorfos oxidados se calcula en función del consumo de permanganato de potasio y luego se obtiene la cantidad de azúcar reductor consultando la tabla.
2. Ámbito de aplicación
GB5009.7-85, este método es adecuado para la determinación de azúcares reductores en todos los alimentos y sustancias de azúcares no reductores convertidas en azúcares reductores por acción del ácido. determinación de hidrólisis o hidrólisis enzimática.
3. Herramientas
(1) Bureta
(2) Crisol Goodman de 25 ml o crisol de fundición vertical G4
( 3) Bomba de vacío
(4) Baño María
4. Reactivos
A menos que se especifique lo contrario, el agua experimental es agua destilada y los reactivos son de calidad analítica.
4.1.6mol/L ácido clorhídrico: Medir 50ml de ácido clorhídrico y diluir con agua hasta 100 ml.
4.2 Indicador rojo de metilo: Pesar 100 mg de rojo de metilo y disolverlo en 100 ml de etanol.
4.3 Solución de hidróxido de sodio 5 mol/L: Pesar 20g de hidróxido de sodio, añadir agua para disolver y diluir a 100ml.
4.4 Solución alcalina de tartrato de cobre A: Pesar 34,639 g de sulfato de cobre (CuSO4 · 5H2O), agregar la cantidad adecuada de agua para disolver, agregar 0,5 ml de ácido sulfúrico, agregar agua para diluir a 500 ml y filtrar con amianto refinado.
4.5 Solución alcalina de tartrato de cobre B: Pesar 173 g de tartrato de sodio y potasio y 50 g de hidróxido de sodio, agregar la cantidad adecuada de agua para disolver, diluir a 500 ml, filtrar con amianto refinado y almacenar en una botella de vidrio con tapón de goma. tapón.
4.6 Amianto refinado: Remoje el amianto en 3 mol/L de ácido clorhídrico durante 2-3 días, enjuáguelo con agua, luego sumérjalo en una solución de hidróxido de sodio de 2,5 mol/L durante 2-3 días y vierta la solución. y luego remojar en una solución de tartrato de cobre alcalino caliente durante varias horas y enjuagar con agua. Remojar en ácido clorhídrico 3 mol/L durante varias horas y luego enjuagar con agua hasta que ya no esté ácido. Luego agregue agua y agite bien para convertirlo en un polvo fino, parecido a una pasta, sumérjalo en agua y guárdelo en una botella de vidrio, que puede usarse para llenar crisoles de Gucci.
4.7 Solución estándar de permanganato potásico 0,1000mol/L.
4,8 Solución de hidróxido de sodio de 1mol/L: Pesar 4g de hidróxido de sodio, añadir agua para disolver y diluir a 100ml.
4.9 Solución de sulfato de hierro: Pesar 50 g de sulfato de hierro, agregar 200 ml de agua para disolver, luego agregar lentamente 100 ml de ácido sulfúrico y, después de enfriar, agregar agua para diluir a 1 L.
4.10 Ácido clorhídrico 3mol/L: Medir 30ml de ácido clorhídrico y añadir agua para diluir hasta 120ml.
5. Métodos comerciales
5.1 Procesamiento de muestras:
5.1.1 Leche, productos lácteos y alimentos que contienen proteínas: pesa alrededor de 0,5 ~ 2 g de muestra sólida. (tome 2 ~ 10 ml de muestra líquida), colóquela en un matraz volumétrico de 250 ml, agregue 50 ml de agua y agite bien. Agregue 10 ml de solución alcalina de tartrato de cobre A y 4 ml de solución de hidróxido de sodio de 1 mol/L, agregue agua hasta la marca y mezcle bien. Dejar reposar por 30 minutos, filtrar con papel de filtro seco, desechar el filtrado inicial y reservar. (Nota: El propósito de este paso es precipitar proteínas)
5.1.2 Bebidas alcohólicas: Tomar 100 ml de muestra, colocarla en un recipiente evaporador, neutralizarla con solución de hidróxido de sodio 1 mol/L, y evaporar al baño maría hasta 1/4 del volumen original (Nota: Si el tiempo de evaporación es demasiado largo se debe tener cuidado de mantener el pH de la solución neutro) y transferir a un matraz aforado de 250 ml. Añade 50 ml de agua y mezcla bien. Siga las instrucciones en 5.1.1 de "Agregue 10 ml de solución de tartrato de cobre alcalino A".
5.1.3 Alimentos que contienen gran cantidad de almidón: Pesar 2 ~ 10g de la muestra, colocarla en un matraz aforado de 250 ml, añadir 200 ml de agua, calentar al baño maría a 45°C durante 1 hora y agitar continuamente.
(Nota: este paso consiste en disolver el azúcar reductor en agua. La temperatura no debe ser demasiado alta, porque el almidón se gelatinizará e hidrolizará a altas temperaturas, lo que afectará los resultados de la prueba). Después de enfriar, agregue agua hasta la marca, mezcle bien y déjalo reposar. Tomar 200 ml del sobrenadante en otro matraz aforado de 250 ml y operar de la siguiente manera: Agregar 10 ml de solución alcalina de tartrato de cobre A para obtener 5.1.1.
5.1.4 Alimentos que contienen grasas: Pesar de 2 a 10 g de muestra, enjuagar tres veces con éter o éter de petróleo y retirar la capa de éter. Añadir 50 ml de agua, mezclar bien y operar de la siguiente manera: De "añadir 10 ml de solución alcalina de tartrato de cobre" obtenemos 5.1.1.
5.1.5 Gaseosas y otras bebidas carbonatadas: Tomar 100 ml de muestra y colocarla en un recipiente de evaporación. Retirar el dióxido de carbono al baño maría, luego transferirlo a un matraz aforado de 250 ml, lavar el evaporador. plato con agua, y fusionar el líquido de lavado en En un matraz aforado, agregar agua hasta la marca, mezclar bien y reservar.
5.2 Determinación de la muestra:
Tomar 50 ml de la solución de muestra tratada, colocar 4 ml en un vaso de precipitados de 400 ml, agregar 25 ml de solución alcalina de tartrato de cobre A y 25 ml de solución alcalina. Solución de tartrato de cobre B, cubra el vaso con un vidrio de reloj, caliente, controle para que hierva en 4 minutos y luego hierva con precisión durante 2 minutos, luego use un crisol Goodman revestido de asbesto o un crisol de fusión vertical G4 para aspirar el filtro, lave el vaso con 60 ℃ agua caliente Y precipitar hasta que la loción ya no sea alcalina. (Nota: la reacción entre el azúcar reductor y el reactivo de tartrato de cobre alcalino debe llevarse a cabo en estado de ebullición y el tiempo de ebullición debe controlarse estrictamente. La solución hervida debe permanecer azul. Si el azul desaparece, significa que el contenido de azúcar reductor es demasiado alto y la solución de muestra debe diluirse nuevamente.) Coloque el crisol antiguo o el crisol de fusión vertical nuevamente en el vaso de precipitados original de 400 ml, agregue 25 ml de solución de sulfato férrico y 25 ml de agua, revuelva con una varilla de vidrio para disolver completamente el óxido cuproso. y utilice una solución estándar de permanganato de potasio de 0,1 mol/L. Valore hasta que esté rojizo.
Al mismo tiempo, absorba 50 ml de agua, agregue cantidades iguales de tartrato de cobre alcalino A y B, solución de sulfato de hierro y agua, y realice un experimento en blanco de reactivo de la misma manera.
6. Cálculo:
x 1 = (V-V 0)×n×71.54(1)
Entre ellos: x 1——azúcar reductor en el muestra La masa es equivalente a la masa de óxido cuproso, mg;
v——El volumen de solución estándar de permanganato de potasio consumido por la solución de muestra de determinación, ml;
v 0— —Reactivo El volumen de solución estándar de permanganato de potasio consumido por el blanco, ml;
n - la concentración de solución estándar de permanganato de potasio;
71,54-1 ml 1 mol/L de solución de permanganato de potasio es equivalente a la masa de óxido cuproso, mg.
Para la masa de óxido cuproso calculada según la fórmula (1), consulte la tabla adjunta "La masa de óxido cuproso equivale a la tabla de masas de glucosa, fructosa, lactosa y azúcar invertido", y luego Calcule la masa de óxido cuproso en la muestra. Contenido de azúcar reductor.
x2=(m1×v2)∕(m2×v1)×(100∕1000)(2)
Donde: X2——el contenido de azúcar reductor en la muestra, g /100g (g/100ml);
m 1——La masa de azúcar reductor obtenida consultando la tabla, mg;
M2——La masa (o volumen) de la muestra, g (ml);
v 1 - el volumen de la solución de tratamiento de la muestra para la determinación,
V2 - el volumen total de la muestra después del tratamiento, ml.
7. Por ejemplo:
Pesar 3,00 gramos de muestra de alimento y ajustar el volumen a 250 ml con agua después del procesamiento. Tome 50 ml para medir, consuma 5,20 ml de solución estándar de manganato de potasio de 0,1003 mol/litro y el blanco del reactivo de medición sea 0,36 ml. Entonces la masa de azúcar reductor en la muestra es equivalente a la masa de óxido cuproso, como sigue: /p>
X1 (mg) = (5,20-0,36) × 0,1003 × 71,54 = 34,73
La masa de azúcar reductor equivale a 16,22 mg de glucosa.
El contenido de azúcar reductor (en términos de glucosa) en la muestra es:
x2(g/100g)=(16,22×250)∕(3,00×50)×(100 ∕1000 )= 2,70
8. Notas:
Este método utiliza una solución alcalina de tartrato de cobre como oxidante. Dado que el sulfato de cobre reacciona con el hidróxido de sodio para formar un precipitado de hidróxido de cobre, que puede reducirse lentamente con tartrato de potasio y sodio para precipitar una pequeña cantidad de precipitado de óxido cuproso, lo que provoca errores en la medición del óxido cuproso, se deben preparar el reactivo A y el reactivo B. y almacenarse por separado, y mezclar en partes iguales rápidamente.