¿Qué es la difteria?
Características de cultivo
La difteria es una bacteria aeróbica o anaeróbica facultativa. La temperatura óptima es 37 °C y el pH óptimo es 7,2 ~ 7,8. Se puede cultivar cuando contiene sangre y suero. o huevos crece bien en el medio de cultivo. Las colonias son blanquecinas, lisas y redondas. Cuando crecen y se multiplican en un medio sérico que contiene 0,033% de telurito potásico, pueden absorber telurio y reducirlo a telurio metálico, haciendo que las colonias se vuelvan negras, al igual que otras bacterias corineformes de este género. . Y el telurito de potasio puede inhibir el crecimiento de otras bacterias en la muestra, por lo que las placas de agar sangre de telurito de potasio se pueden utilizar como medio de selección en forma de varilla. Según las características y reacciones bioquímicas de las bacterias de la difteria en este medio de cultivo, las bacterias de la difteria se pueden dividir en tres tipos: graves, intermedias y leves. La distribución de los tres tipos de bacterias de la difteria es diferente, a menudo en diferentes regiones y años, y tiene importancia epidemiológica.
Resistencia
No es resistente al calor y la humedad y es sensible a los desinfectantes generales. Morirá rápidamente después de 10 minutos a 60 ℃ o después de hervir. Morirá después de 1 minuto con ácido carbólico al 1%. Sin embargo, su resistencia al secado, al frío y a la luz solar es más fuerte que la de otras bacterias que no contienen esporas. sobrevivir durante muchos días con artículos de primera necesidad, comida y ropa. Esta cepa es sensible a la penicilina y a los antibióticos de uso común.
Patogenicidad
La principal sustancia patógena de esta bacteria es la toxina diftérica. La toxina diftérica es una cadena polipeptídica con dos enlaces disulfuro y un peso molecular de 62.000. Después de la hidrólisis por proteasa, se puede dividir en dos fragmentos, A y B, que todavía están conectados por enlaces disulfuro. El fragmento b no tiene actividad enzimática y puede unirse a receptores específicos en la superficie de las células susceptibles del huésped, lo que permite que el fragmento A ingrese a la célula mediante translocación. El fragmento A tiene actividad enzimática que hidroliza la nicotinamida adenina dinucleótido (NAD+) oxidada en nicotinamida y adenina ribosa difosfato (ADPR) y cataliza la unión del factor de elongación 2 (EF-2) a ADPR, lo que hace que EF-2 pierda su actividad de translocación. , impidiendo así la transferencia de péptido-ARNt y ARNm del aceptor al donante en el ribosoma. Sólo los bacilos lisogénicos de la difteria que portan el fago de la β-corinebacteria pueden producir exotoxina, porque la toxina de la difteria es una proteína codificada por el gen de la toxina del fago de la β-corinebacteria (tox+). La expresión del gen tox+ está estrechamente relacionada con el contenido de hierro inorgánico de las bacterias. Cuando el contenido de hierro es moderado, se expresa el gen tox+, en caso contrario no se expresa.
La difteria también produce algunas sustancias invasivas, como factores cable similares a Mycobacterium tuberculosis, que pueden dañar la membrana mitocondrial de las células, provocando depresión respiratoria y fosforilación oxidativa.
Causa de la enfermedad
La difteria es débilmente invasiva. Después de invadir la mucosa del tracto respiratorio superior, solo se multiplica en las células epiteliales superficiales y generalmente no causa bacteriemia. Cuando se daña la mucosa local, como en el caso del sarampión, la escarlatina, la tos ferina o la infección del tracto respiratorio superior, aumenta la invasividad de los bacilos de la difteria. Las exotoxinas producidas durante el proceso de reproducción de los bacilos de la difteria no solo pueden causar lesiones locales, sino también lesiones tóxicas sistémicas, que es la principal causa de la enfermedad. Esta toxina consta de dos subunidades, A y B, unidas por enlaces disulfuro. La subunidad B no es directamente tóxica, pero tiene un dominio de unión al receptor y un dominio de translocación. La subunidad B puede unirse a un receptor específico en la superficie celular (receptor de membrana pro-hHB-EGF) y, después de unirse, la subunidad A puede transportarse al citoplasma del huésped mediante la mediación de la región de translocación (Figura 1).
La subunidad A es tóxica y puede inactivar el factor de elongación intracelular-2 (EF-2). EF-2 es una enzima necesaria para la reacción de translocación de la síntesis de cadenas peptídicas. Debido a su inactivación, la cadena peptídica que se sintetiza en el "aceptor" del ribosoma no puede translocarse al "donante" del ribosoma, de modo que el aminoacil-ARNt no puede unirse al ribosoma, la reacción de elongación de la cadena peptídica se detiene y la célula diana no puede Sintetizan proteínas y mueren, por lo que la toxina diftérica tiene un efecto letal directo sobre las células de los mamíferos. Las bacterias causan necrosis de las células epiteliales de la mucosa, vasodilatación, exudación masiva de fibrina e infiltración de leucocitos en los tejidos locales. El fuerte efecto tóxico de las exotoxinas sobre las células agrava la inflamación local y la necrosis. Una gran cantidad de fibrina exudada se coagula con células necróticas, glóbulos blancos y bacterias, cubriendo la superficie mucosa dañada para formar una lesión especial de esta enfermedad, a saber, una pseudomembrana. Las pseudomembranas generalmente son blanquecinas, pueden verse amarillas o sucias cuando se infectan y pueden verse negras cuando sangran. Delgado al principio y luego grueso, los bordes están limpios y no se caen fácilmente. Se pueden ver puntos de sangrado al despegar.
El sitio de formación de pseudomembrana y el tejido circundante mostraron hiperemia e hinchazón leves. La pseudomembrana formada en la parte de la laringe, la tráquea y los bronquios cubiertos por epitelio columnar no se adhiere estrechamente a la mucosa y puede caerse fácilmente y provocar asfixia. Las exotoxinas se absorben localmente y provocan síntomas de toxemia sistémica. La cantidad de toxina absorbida varía según la ubicación y extensión de la pseudomembrana. La faringe absorbe la mayor cantidad de toxinas, seguida de las amígdalas y, en menor medida, la laringe y la tráquea. Cuanto más extensa sea la pseudomembrana, mayor será la absorción de toxinas y más grave será la afección. Las toxinas pueden ser neutralizadas por antitoxinas cuando se adsorben en la superficie celular, pero no pueden ser neutralizadas por antitoxinas después de ingresar a las células. Por lo tanto, se pone énfasis clínico en la aplicación temprana y adecuada de antitoxinas. Las exotoxinas pueden causar lesiones sistémicas después de combinarse con varias células tisulares. Entre ellos, destacan el miocardio y los nervios periféricos. El corazón suele aumentar de tamaño en la etapa inicial y el miocardio suele estar turbio, hinchado y graso. En las últimas etapas puede haber degeneración vítrea multifocal, necrosis miocárdica e infiltración de células mononucleares, y también pueden estar afectados los haces conductores. Finalmente, el corazón puede tener hiperplasia del tejido conectivo y ocasionalmente trombosis. La neuropatía es más común en los nervios periféricos, donde la vaina de mielina suele ser grasa y el eje del nervio está roto. Tanto los nervios sensoriales como los nervios motores pueden verse afectados, pero los nervios motores son los principales y los nervios craneales noveno y décimo son los más susceptibles. Los nervios lesionados rara vez mueren, por lo que la parálisis por difteria casi siempre es recuperable. Los riñones pueden volverse turbios e hinchados, y las células epiteliales tubulares renales pueden caerse. Las glándulas suprarrenales pueden estar congestionadas, degeneradas o sangrando. Los hepatocitos pueden ser grasos y los lóbulos hepáticos pueden tener necrosis central.
Vía de transmisión
Se transmite principalmente a través de gotitas respiratorias. También se puede transmitir a través de manos, juguetes, artículos de papelería, utensilios y pañuelos contaminados. Hay informes ocasionales de epidemias causadas por leche contaminada. También puede infectarse a través de la piel y las membranas mucosas dañadas.
Manifestaciones clínicas de los primeros síntomas
El periodo de incubación es de 1 a 7 días, normalmente de 2 a 4 días. Según la ubicación de la pseudomembrana y la gravedad de los síntomas de intoxicación, se divide en las siguientes categorías:
(1) La difteria faríngea es la más común y representa aproximadamente el 80% de la incidencia.
(1). Cuando prevalece la difteria sin difteria pseudomembranosa, algunos pacientes solo presentan síntomas del tracto respiratorio superior, como dolor de garganta, y síntomas leves de intoxicación sistémica. Sólo hubo una leve inflamación de la faringe. Las amígdalas pueden estar agrandadas, pero no hay formación de pseudomembrana o sólo hay una pequeña cantidad de exudación de fibrina y el cultivo bacteriano es positivo. Estos pacientes son propensos a diagnósticos erróneos y subdiagnósticos.
(2) Difteria faríngea localizada
① La pseudomembrana de la difteria faríngea se limita al arco palatino, la úvula, etc., y los síntomas son leves.
②La pseudomembrana de la difteria amigdalina se limita a una o ambas amígdalas. El inicio es lento, con fiebre leve a moderada, malestar general, fatiga, pérdida de apetito y dolor de garganta leve. Las amígdalas estaban congestionadas y ligeramente hinchadas, y las pseudomembranas eran puntiformes al principio y luego se fusionaron formando láminas. Los ganglios linfáticos submandibulares pueden inflamarse y causar un ligero dolor.
(3) La difteria se transforma principalmente desde formas localizadas y diseminadas. La mayoría van acompañadas de infecciones mixtas. Si no se trata a tiempo, la tasa de mortalidad es extremadamente alta.
Estos síntomas: las pseudomembranas a menudo se vuelven negras debido al sangrado, las amígdalas y la faringe están muy inflamadas, bloqueando la abertura faríngea, o necróticas para formar úlceras, y tienen un olor pútrido especial. La inflamación de los ganglios linfáticos cervicales y el edema de los tejidos blandos circundantes provocan un engrosamiento del cuello (cuello bovino). Los síntomas de intoxicación sistémica son graves e incluyen fiebre alta, dificultad para respirar, cianosis de los labios, pulso filiforme y latidos cardíacos irregulares.
(4) Las pseudomembranas diseminadas de la difteria faríngea se extienden desde las amígdalas hasta la úvula, el paladar blando, la pared posterior de la faringe, la nasofaringe o la laringe. La pseudomembrana es gris o blanco amarillenta, con bordes claros y el tejido circundante está muy inflamado. Las amígdalas bilaterales se hinchan e incluso llenan la garganta, provocando dificultad para respirar. Los ganglios linfáticos del cuello están inflamados y rodeados de edema.
Tales síntomas: síntomas graves de intoxicación sistémica, como fiebre alta, fatiga, anorexia, dolor de garganta, etc. ; los casos graves pueden provocar insuficiencia circulatoria.
(2) La difteria nasal es relativamente rara y es más común en bebés y niños pequeños. Los síntomas sistémicos son leves o están ausentes e incluyen congestión nasal, hemorragias nasales, exfoliación o ulceración superficial de la piel alrededor de las fosas nasales y pseudomembranas blancas en el vestíbulo nasal.
(3) Difteria de garganta: La difteria de garganta representa alrededor del 20%. Un pequeño número de casos son primarios y alrededor de 3/4 son causados por la diseminación descendente de la difteria desde la faringe. La absorción de la toxina diftérica laríngea primaria es menor y los síntomas de intoxicación sistémica no son graves. La difteria laríngea secundaria a menudo ocurre sobre la base de la difteria faríngea, acompañada de manifestaciones clínicas de difteria laríngea y síntomas graves de intoxicación sistémica.
Sin embargo, algunas pseudomembranas se extienden hasta la tráquea y los bronquios, lo que puede provocar diversos grados de fuerte resistencia. Los síntomas son tos seca intensa, ronquera e incluso pérdida de la voz y dificultad para respirar. En casos graves, puede producirse cianosis y el cuchillo puede morir por asfixia.
(4) Los bacilos de Diphtheria diphtheriae pueden invadir la conjuntiva, los oídos, la vulva, el cordón umbilical y lesiones cutáneas de los recién nacidos en otras partes, produciendo pseudomembranas y secreciones purulentas. La difteria de los ojos, oídos y vulva es en su mayoría secundaria. La difteria cutánea es más común en zonas tropicales y tiene una evolución más prolongada. Las lesiones cutáneas suelen durar mucho tiempo y puede aparecer melanosis después de la curación.
Tales síntomas: síntomas de intoxicación sistémica, pero puede producirse parálisis de nervios periféricos.
Diagnóstico
Los pacientes con sospecha clínica de difteria no necesitan esperar los resultados de las pruebas y deben ser tratados con antitoxinas y antibióticos de inmediato. Sin embargo, el primer brote de difteria debería haberse confirmado mediante un examen microbiológico.
(A) Microscopía de tinción directa
Utilice un hisopo de algodón para tomar el exudado del borde de la pseudomembrana, untarlo, teñirlo con Nessler o Melan y comprobar si hay metástasis debajo. el microscopio Partículas de Corynebacterium. Combinado con los síntomas clínicos, se puede hacer un diagnóstico preliminar. El diagnóstico debe realizarse mediante cultivo bacteriano y pruebas de toxicidad.
(2) Método de cultivo de hisopo de suero coagulado
Coloque el hisopo de algodón teñido con suero de caballo o vaca en un tubo de ensayo estéril y esterilícelo con 8 a 10 libras de vapor durante 20 a 30 minutos, provocando la coagulación del suero. Tome una muestra de garganta del paciente con un hisopo de suero coagulado, incúbela a 37 °C durante 8 a 10 horas y realice una baciloscopia directa. Este método se puede utilizar para un diagnóstico de cultivo rápido durante una gran cantidad de exámenes.
(3) Inspección de capacitación
Inocular materiales de prueba de algodón en medio inclinado de huevo o en medio inclinado de coagulación de suero de Leffer y en medio de placa de telurito de potasio, y cultivar a 37°C. Cuando las típicas colonias grises sospechosas crezcan en la placa inclinada o en la placa, selecciónelas y trasplántelas a huevos o placas inclinadas de suero para su aislamiento y cultivo para una mayor tinción morfológica o identificación de pruebas de toxicidad.
(4) Prueba de toxicidad
1. Seleccione dos cobayas que pesen 250 gramos y a uno de ellos se le inyectará por vía intraperitoneal 250 ~ 500 unidades de antitoxina diftérica 12 horas antes de la prueba. como control. Luego compara. Luego, se inyectaron por vía subcutánea 2 ml de medio de cultivo de 48 horas. Si el conejillo de indias al que se le ha inyectado la antitoxina muere en un plazo de 2 a 4 días, mientras que el conejillo de indias de control sobrevive, se demuestra que la cepa de prueba es un bacilo de difteria virulento.
2.e-Prueba en placa: Pegar una tira de papel de filtro estéril empapada con antitoxina diftérica en una placa de agar que contenga un 20% de suero de caballo, y luego inocular las bacterias a analizar en la dirección vertical de la También se inocularon como controles cepas conocidas productoras de virus y cepas no productoras de virus. Después de 48 horas de incubación a 37°C, si la cepa a analizar produce exotoxina diftérica, aparecerá una línea de precipitación blanca en la unión de la tira de papel de filtro y el césped de crecimiento rayado.